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氨基酸脱羧酶试验培养基使用指导 - 尊龙凯时人生就博

来源:褚辉芬 日期:2025-07-31

尊龙凯时人生就博的氨基酸脱羧酶试验是一种重要的生物医学检测方法,能够帮助鉴定细菌的生化特性与代谢能力。

氨基酸脱羧酶试验培养基使用指导 - 尊龙凯时人生就博

一、试验概述

氨基酸脱羧酶是细菌为适应生长环境而进化出的一种机制。当发酵过程产生的酸性环境对细菌生长不利时,细菌会诱导产生氨基酸脱羧酶,使氨基酸的羧基脱去,生成碱性胺类化合物,从而中和环境中的酸性。不同细菌生成的氨基酸脱羧酶种类各异,常见的有赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶及精氨酸双水解酶,通过检测这些酶的活性,可以作为细菌生化特性鉴定的方法之一。

二、培养基配方

在氨基酸脱羧酶试验中,培养基成分如下:

  • 蛋白胨:5 g/L
  • 牛肉浸粉:3 g/L
  • 葡萄糖:1 g/L
  • 溴甲酚紫:0.02 g/L
  • 氨基酸(赖氨酸、鸟氨酸或精氨酸):5 g/L

注意:氨基酸应使用L型,如果使用DL混合型氨基酸,需加倍用量。培养基的pH应保持在6.8 ± 0.2。

三、试验方法与原理

首先,制备约109 CFU/mL的待测菌株悬液,然后取50-100μL接种至氨基酸脱羧酶试验管和相应的对照管,覆盖无菌液体石蜡以隔绝空气,放置于36±1℃的适宜环境中培养。

原理是:在对照管中,细菌生长后分解葡萄糖产生酸,导致pH值下降,管内颜色由紫色转为黄色。而在氨基酸脱羧酶试验管中,细菌在酸性条件下诱导产生氨基酸脱羧酶,分解氨基酸产生碱性,最终使培养基pH上升,颜色变为紫色。若对照管和试验管均为黄色,则表明氨基酸脱羧酶阴性;若对照管为黄色而试验管为紫色,则说明氨基酸脱羧酶阳性。

四、对照管的意义

对照管变黄的原因在于细菌在厌氧状态下分解葡萄糖产生酸,导致培养基pH值下降。根据细菌对葡萄糖的利用方式,可分为三种类型:发酵型、氧化型和产碱型。只有发酵型细菌会使对照管变黄,而氧化型和产碱型细菌则不具备此能力。

此外,如果试验管呈紫色,则可能存在两种情况:一是细菌未利用培养基中的糖和氨基酸;二是细菌先分解糖产生酸,再通过氨基酸脱羧产生碱,因此培养基颜色最终保持紫色。对照管的状态对此判断至关重要,若对照管变黄而试验管紫色,则可确认氨基酸脱羧酶阳性。

五、实际鉴定中的注意事项

在菌株鉴定过程中,如果对照管呈紫色,可能遇到以下情况:如果为氧化型或产碱型细菌,则无法判断其氨基酸脱羧酶的阳性或阴性。此方法仅适用于发酵型细菌的检测。此外,发酵型细菌在分解葡萄糖产生酸的能力上也存在差异,表现为不同的颜色变化,对照管和试验管之间的色差可作为判定依据。

总之,氨基酸脱羧酶试验是细菌生化特性鉴定的重要手段,尊龙凯时人生就博将持续推动这一领域的研究与应用,以助力医疗健康事业的发展。

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